薄層色譜法 是一種用于分離和分離本質上不揮發的混合物的色譜法。 就像其他色譜過程一樣,這個過程由流動相和固定相組成。
后者是一層薄薄的吸收材料,例如氧化鋁、硅膠或纖維素。 該層應用于稱為惰性基材的塑料、玻璃或鋁箔片。 TLC 程序中的流動相 是溶劑或其混合物。
如果您想了解有關 更多信息 薄層色譜程序的 ,那么您來對地方了。 在這里我們將討論它的原理、過程和在不同行業中的應用。
我們將從 TLC 原理開始。
薄層色譜原理
TLC 程序的分離原理基于給定化合物對流動相和固定相的相對親和力。 該過程從在固定相表面上移動流動相開始。 在此運動期間,與低親和力化合物相比,高親和力化合物獲得的速度更慢。 這導致他們的分離。
程序完成后,可以在不同水平的靜止表面上找到不同的點,反映混合物的各種元素。 基本上,更容易被固定相吸引的化合物將它們的位置固定在較低的水平,而其他化合物則移向表面的較高水平。 因此可以相應地看到它們的斑點。
在 TLC 原理之后,現在讓我們繼續其程序。
薄層色譜程序
從上面提到的信息,您必須清楚TLC的工作原理。 但是,您仍然需要了解其完整程序才能查看其全部功能。 TLC 程序中涉及的一些組件如下。
TLC 板: 這些用于施加薄層固定相。 它們本質上是惰性或穩定的。 固定相層在這些板中保持均勻,以便更好地進行分析。 通常,進行實驗的人更喜歡即用型板。
流動相: 這包括溶劑(或溶劑混合物)。 所使用的溶劑必須具有化學惰性、盡可能高的純度且無顆粒。 只有這樣才能形成 TLC 斑點。
TLC 室: 這是進行薄層色譜程序的地方。 它使灰塵顆粒遠離過程,并且不會讓溶劑蒸發。 為了適當地開發斑點,該室內保持均勻的環境。
濾紙: 用流動相溶液潤濕后放置在腔室內。 它確保流動相在整個 TLC 板的長度上均勻上升。
收集完所有這些組件后,該過程就開始了。 以下是其中的步驟:
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該過程首先用鉛筆在 TLC 板的底部做一個薄標記。 它有助于樣品點的應用。 這些點保持相等的距離。
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然后將樣品施加到在線制作的這些點上。
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然后將流動相填充到 TLC 室底部幾厘米處。
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倒入流動相后,將濕潤的濾紙與腔壁內側一起放置。 這有助于通過保持相等的濕度來避免邊緣效應。
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*后,將準備好的固定相板放入腔室內。 此時,樣品點保留在流動相一側。
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然后在將板放入腔室后關閉腔室。
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一旦該過程經過足夠的時間,取出板并使其干燥。
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*后,通過適合樣品的方法對樣品斑點進行分析,例如紫外光、KMnO4 染色和碘染色。
這樣,TLC 程序就完成了。 分析完化合物后,它會以其相對遷移率的術語進行描述,即計算其 Rf 值。 即使在相同的情況下,每個化合物的該值也會發生變化。
通常,這里會使用相對 Rf,因為可能無法保持所有 TLC 因子恒定。 這些方面包括吸附劑、溫度、吸附劑厚度、點狀材料的數量和溶劑系統。 用于 Rf 值計算的公式為:
Rf =(樣品覆蓋的距離)/(溶劑覆蓋的距離)
薄層色譜應用
僅僅了解TLC的原理和程序是不夠的。 您還需要了解薄層色譜的用途,以了解它在現實世界中的工作方式和位置。 一些標準的 TLC 應用包括:
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作為一種分離過程,TLC 被證明對于分離由多種成分組成的藥 物制劑非常有效。
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該過程可用于檢查給定產品的純度。
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局部麻醉劑、鎮痛劑、鎮 靜劑、催眠藥、抗驚厥鎮 靜劑和類固醇等藥 物都通過 TLC 程序 進行定性測試。
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化妝品行業還使用 TLC 來檢查產品中是否存在防腐劑。
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可以使用 TLC 純化給定的化合物,然后與標準樣品進行比較。
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TLC 也可用于生化分析。 在這里,它可用于從尿液、血漿、血清和體液中分離生化代謝物。
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就像化妝品行業一樣,食品行業也使用 TLC 檢測防腐劑、人造色素和甜味劑。
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還可以使用 TLC 跟蹤反應的進度以查看它是否完成。
這些是一些典型的薄層色譜應用,您可以在不同的地方找到它們。 但是,該程序不僅 限于這些,您還可以在許多其他行業中看到它的使用。
薄層色譜的 優點和缺點
*后,讓我們探討一下使用薄層色譜程序的一些優點和缺點。
薄層色譜的優勢
這些包括:
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可以毫無困難地進一步可視化 TLC 的分離點。
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與其他方法相比,該色譜過程具有成本效益。
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它可以用于許多化合物,并且不需要太多時間,因為它更快。
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這個過程比其他方法簡單得多。
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TLC 使分析任何給定化合物的純度標準變得簡單。
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幾種化合物可以通過 TLC 輕松分離。
TLC的缺點
該過程的缺點是:
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TLC 程序 不能用于檢測下限實驗,因為它具有很高的檢測限。
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TLC 中使用的板不具有更長的固定相。
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結果再現在 TLC 中具有挑戰性。
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TLC僅 限于定性分析,不能用于定量分析。
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與其他色譜方法相比,分離長度也受到限制。
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這里的過程不是在封閉系統中進行的。 因此,溫度和濕度等方面會影響結果,使其不準確。
我們希望所有這些信息能幫助您了解有關薄層色譜概念的一切。