氣相色譜法和高效液相色譜法都是分離技術,在學術和工業實驗室都得到了廣泛的應用。高效液相色譜法在醫藥、食品、生命科學和聚合物等領域得到了廣泛的應用,而氣相色譜法在石油和石化工業、香精和香料以及環境空氣監測等領域有著重要的應用,。您腦海中出現的一個普遍問題是HPLC和GC有何不同,以及哪些因素決定了兩者的適用性。
流動相
顧名思義,高效液相色譜法使用液體流動相,氣相色譜法使用氣體作為載體。液體通常是相容極性溶劑的混合物,而在氣相色譜中,流動相是單一的高純度氣體。
工作溫度
HPLC分離主要在環境溫度下進行,而氣相色譜分離則在高溫下進行,高溫可保持在恒定值(等溫)或由溫度程序決定的變量。新型填料也擴展了高效液相色譜操作的溫度限制。
化合物的性質
氣相色譜分離主要對分子量高達數百的化合物進行。這些化合物根據其揮發性的不同而分離,并在高溫下保持穩定。另一方面,對于大聚合物和生物分子,通過HPLC分離的化合物具有較高的分子量,從數百到數百萬不等。這種化合物只能在室溫下進行分析,因為在高溫下它們容易降解。
柱尺寸
與氣相色譜中使用的氣體相比,HPLC中用作載體的液體通常具有更高的粘度。這導致HPLC中柱背壓增加。正是由于這個原因,與GC柱相比,高效液相色譜柱更短,直徑更大,GC柱更長、更窄。增加色譜柱長度可提高密集峰之間的分辨率。隨著分析速度的加快,用于HPLC的色譜柱長度短至1厘米。
柱填料
與氣體相比,柱填料對液體流動的阻力更大。氣體也比液體具有更高的固體載體滲透性。HPLC柱的保留模式取決于極性差異或分子大小,而GC分離基于化合物揮發性的差異檢測原理
HPLC檢測通?;跓o損檢測,如UV、RI、光電二極管陣列檢測器、電導率和激光檢測。另一方面,氣相色譜檢測主要基于破壞性原理,如FID、NPD和FPD。LC和GC共有的質譜檢測器本質上是破壞性的。
運營成本
與用于GC分析的氣體相比,HPLC溶劑成本較高。除溶劑成本外,由于泵和色譜柱中產生的高壓,高效液相色譜系統的維護成本也較高。相比之下,氣相色譜分析成本更低,維護成本更低。
高效液相色譜法和氣相色譜法都是多用途的,它們的應用范圍不斷擴大。LC–MS–MS和GC –MS–MS等串聯技術將檢測限擴展到檢測和自動化的新領域,也有助于提高實驗室通量。